灌流式細(xì)胞培養(yǎng)
細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在生物制藥的大規(guī)模生產(chǎn)中扮演著至關(guān)重要的角色。與微生物及昆蟲細(xì)胞相比,哺乳動(dòng)物細(xì)胞具有翻譯后修飾功能,在蛋白類藥物表達(dá)方面展現(xiàn)出了獨(dú)特的優(yōu)勢,是生物藥生產(chǎn)的首選平臺(tái)。
不過,哺乳動(dòng)物細(xì)胞倍增時(shí)間長、代謝途徑復(fù)雜、對(duì)外界環(huán)境敏感性強(qiáng),對(duì)營養(yǎng)要求苛刻,細(xì)胞狀態(tài)容易改變,較之傳統(tǒng)的微生物細(xì)胞培養(yǎng),難度更大。
灌流培養(yǎng)工藝可以顯著提高重組蛋白和單克隆抗體的產(chǎn)量、質(zhì)量,成本也更低,因此,F(xiàn)DA極大地鼓勵(lì)生物藥生產(chǎn)工藝轉(zhuǎn)型至灌流培養(yǎng),這樣就能用更低的成本,將新藥推向市場,惠及大眾。
如何進(jìn)行灌流式細(xì)胞培養(yǎng)?
中空纖維生物反應(yīng)器,是連續(xù)灌流操作常用的一種反應(yīng)器,由一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的細(xì)胞培養(yǎng)生物反應(yīng)器,和一個(gè)中空纖維濾芯系統(tǒng)組成。近年來,在商業(yè)改性蛋白質(zhì)和單克隆抗體的生產(chǎn)中,中空纖維灌流式生物反應(yīng)器越來越受歡迎。
這套系統(tǒng)可以在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中,清除和目標(biāo)產(chǎn)物一起產(chǎn)生的廢物,保持培養(yǎng)基的健康,同時(shí)還可以通過蠕動(dòng)泵,對(duì)使用過的培養(yǎng)基進(jìn)行更換。
與傳統(tǒng)的間歇式細(xì)胞培養(yǎng)不同,灌流反應(yīng)器可以長時(shí)間連續(xù)運(yùn)行,有些系統(tǒng)可以運(yùn)行長達(dá)六個(gè)月。在這一過程中,培養(yǎng)產(chǎn)物通過中空纖維濾芯過濾,產(chǎn)生粗抗體混合物,然后再通過色譜法對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行純化。
LAUDA精準(zhǔn)溫控 用于灌流式細(xì)胞培養(yǎng)
相較于傳統(tǒng)的批次培養(yǎng)工藝,灌流培養(yǎng)工藝最顯著的特點(diǎn),是可以為細(xì)胞提供一個(gè)穩(wěn)定且有利的生長環(huán)境,這主要得益于在培養(yǎng)過程中維持各個(gè)環(huán)境參數(shù)的穩(wěn)定。
灌流式生物反應(yīng)器使用專門針對(duì)培養(yǎng)條件,優(yōu)化過后的細(xì)胞系,一旦達(dá)到最佳細(xì)胞密度和條件,就會(huì)啟動(dòng)目標(biāo)蛋白質(zhì)或抗體的表達(dá)。溫度、pH 值和化學(xué)條件,對(duì)于觸發(fā)和維持目標(biāo)蛋白質(zhì)或單克隆抗體的表達(dá)至關(guān)重要。由于優(yōu)化的細(xì)胞系是為理想條件設(shè)計(jì)的,所以一旦工藝條件偏離預(yù)先設(shè)定的參數(shù),運(yùn)行就會(huì)結(jié)束。
溫度必須在整個(gè)灌流培養(yǎng)工藝過程中保持穩(wěn)定!這正是您需要 LAUDA 的原因。
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